Guanidiintiotsüanaat 593-84-0 hõlbustab nukleotiidide ja peptiidide ekstraheerimist loomade siseelunditest

Guanidiintiotsüanaat | 593-84-0 | on tugev valgu denatureerija. See on valge kristalne pulber, ärritav ja valgustundlik. See lahustub etanoolis ja vees, sulamistemperatuur on 118℃. Guanidiintiotsüanaati kasutatakse peamiselt denatureerimiseks, rakkude lüüsimine ning RNA ja DNA ekstraheerimine. See on tavaline keemiline komponent nukleiinhapete ekstraheerimiseks.

Patendis cn111500664a avaldatakse meetod nukleotiidide ja polüpeptiidide ekstraheerimiseks loomade siseelunditest guanidiintiotsüanaadi abil. Nukleotiidid on puriinalusest või pürimidiinalusest, riboosist või desoksüriboosist ja fosforhappest koosnevad ühendid, mida kasutatakse laialdaselt meditsiinis, ema- ja lapsekaupades, maitseainetes ja toidu lisaainetes. Polüpeptiid on Î ±- Ühendid, mis on moodustatud peptiidsidemetega ühendatud aminohapetest, on valkude hüdrolüüsi vaheproduktid, mis hõlmavad inimese hormoonide, närvide, rakkude kasvu ja paljunemise erinevaid valdkondi. Nende tähtsus seisneb organismi erinevate süsteemide ja rakkude füsioloogiliste funktsioonide reguleerimises, vastavate ensüümide aktiveerimises organismis, vahepealse metaboolse membraani läbilaskvuse edendamises või DNA transkriptsiooni kontrollimises või spetsiifilise valgu sünteesi mõjutamises.

Loomade siseelundid on rikkad nukleotiidide ja peptiidide poolest, kuid praegu toimub nukleotiidide ja peptiidide ekstraheerimine enamasti eraldi, mille tulemuseks on ressursside raiskamine ja keerulised protsessid. Guanidiintiotsüanaat on abiks nukleotiidide ja peptiidide ekstraheerimisel loomade siseelunditest. Konkreetsed meetodid on järgmised:

Esmalt peske värskete loomade siseelundid, tühjendage need, tükeldage need, seejärel purustage need, lisage segatud lahuse saamiseks deioniseeritud vesi, seejärel lisage segatud lahusele guanidiintiotsüanaadi lahus, vibreerige ja segage hästi ning seejärel seista. Seejärel lisatakse sellele ränidioksiidi sisaldav kandja, sest guanidiintiotsüanaat lõhustab rakud ja rakkudest vabanenud nukleotiidid kombineeritakse ränidioksiidi kandjaga. Eemaldage ränidioksiidi sisaldav kandja, absorbeerige ja eraldage see eluendiga, et saada puhastatud nukleotiide.

Seejärel lisatakse jääklahusele, millest ränidioksiidi kandja on välja võetud, NaCl lahus, segulahus ekstraheeritakse, seejärel lisatakse komposiitproteaas, seejärel viiakse läbi mikrolaine ensümaatiline hüdrolüüs, ensümaatiline hüdrolüüsilahus kuumutatakse veevannis , tsentrifuugitakse, supernatant võetakse ja polüpeptiid saadakse pärast külmkuivatamist.

See meetod kasutab omadusi, mille kohaselt guanidiintiotsüanaat võib hävitada rakustruktuuri ja denatureerida valku. See ei saa mitte ainult järjest eraldada nukleotiide ja peptiide, vaid sellel on ka lihtsa meetodi ja kõrge efektiivsuse eelised. Samal ajal väldib see ka biokeemiliste reaktiivide vahelise reaktsiooni probleemi biokeemiliste reaktiivide lisamisel ekstraheerimiseks.